Будьте здоровы!

Выявление рнк вируса гепатита с методом пцр



Вирус гепатита С, РНК HCV, ПЦР real-time качественный

Другие анализы раздела

Биоматериал: цельная кровь (ЭДТА).

Вирус гепатита С, РНК HCV, ПЦР real-time качественный – метод определения РНК вируса гепатита С в сыворотке крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме реального времени . Данный метод ныне является самым быстрым и достоверным метод диагностики инфекционных заболеваний.

Вирус гепатита С (ВГС, HCV) поражает клетки печени, а также некоторые клетки крови (нейтрофилы, моноциты, В-лимфоциты).

Основной путь передачи вируса гепатита С – кровь (препараты для переливания элементов крови и плазмы, донорские органы, нестерильные шприцы, иглы, инструменты), реже заражение половым путём. Одним из основных факторов риска инфицирования является употребление инъекционных наркотиков.

Основные клинические проявления гепатита С очень неспецифичны: слабость, утомляемость, тошнота, отсутствием аппетита, потеря веса, при циррозе печени может появиться желтуха. Как правило, гепатит С протекает бессимптомно и в большинстве случаев диагностируется случайно. Гепатит C может вызвать как острую, так и хроническую инфекцию гепатита, которая влечет серьезное пожизненное заболевание. Попадая в организм, вируса гепатита С (HCV) проникает в макрофаги крови и гепатоциты печени, где происходит его возобновление. Печень повреждается главным образом за счет иммунного лизиса, также вирус оказывает прямое цитопатическое действие. В отличии от других вирусных гепатитов, гепатит С имеет менее яркую клиническую картину и в большинстве случаев переходит в хронические формы. Чаще всего хронический гепатит С приводит к развитию цирроза печени и очень редко - к развитию гепато-целлюлярной карциномы. С большой частотой возникают аутоиммунные осложнения.

Длительность латентого периода от 6 до 8 недель. В конце которого наблюдается повышение уровня печеночных трансаминаз, возможно увеличение печени и селезенки. Острый период протекает со слабостью, снижением аппетита. В 30% случаев возникает лихорадка, артралгия, полиморфная сыпь. Возможны диспептические явления и полинейропатии. Очень редко возникает холестаз. Лабораторные показатели отражают цитолиз. При высоком уровне трансаминаз (более 5 норм) и признаках печеночно-клеточной недостаточности следует заподозрить микст-инфекцию: HCV+HBV. Острый вирусный гепатит, как правило, протекает бессимптомно и в большинстве случаев остаётся невыявленным. Наиболее тяжелые исходы хронического гепатита С – цирроз печени и гепатоцеллюлярная карцинома.

Качественное определение содержания РНК гепатита С в клинических образцах позволяет подтвердить присутствие вируса гепатита С и его активное размножение.

Специальная подготовка не требуется. Рекомендуется взятие крови не ранее чем через 4 часа после последнего приема пищи.

Общие правила при подготовке к исследованию:

  • По возможности, рекомендуется сдавать кровь утром, в период с 8 до 11 часов, натощак (не менее 8 часов и не более 14 часов голода, питье – вода, в обычном режиме), накануне избегать пищевых перегрузок.
  • Если вы принимаете какие-то лекарственные препараты, следует проконсультироваться с врачом по поводу целесообразности проведения исследования на фоне приёма препаратов или возможности отмены приёма препарата перед исследованием, длительность отмены определяется периодом выведения препарата из крови.
  • Алкоголь – исключить приём алкоголя накануне исследования.
  • Курение - не курить минимально в течение 1 часа до исследования.
  • Исключить физические и эмоциональные стрессы накануне исследования.
  • После прихода в медицинский офис рекомендуется отдохнуть (лучше - посидеть) 10-20 минут перед взятием проб крови.
  • Нежелательно сдавать кровь для лабораторного исследования вскоре после физиотерапевтических процедур, инструментального обследования и других медицинских процедур. После некоторых медицинских процедур (например, биопсия предстательной железы перед исследованием ПСА) следует отложить лабораторное обследование на несколько дней.
  • При контроле лабораторных показателей в динамике рекомендуется проводить повторные исследования в одинаковых условиях: в одной лаборатории, сдавать кровь в одинаковое время суток и пр.
  • Клинические признаки гепатита.
  • Профилактические скрининговые исследования (РНК вируса гепатита С - самый ранний маркёр при острой инфекции).
  • Обследования контактных лиц.
  • Диагностика гепатитов смешанной этиологии - выявление ведущего вируса.
  • Выявление стадии активной репликации вируса при хроническом состоянии.
  • Контроль эффективности проводимой терапии.
  • Цирроз печени.

Тест качественный. Результат выдаётся в терминах обнаружено или не обнаружено .

обнаружено : в анализируемом образце биологического материала найден фрагмент РНК, специфичный для вируса гепатита С, инфицирование вирусом гепатита С;

не обнаружено : в анализируемом образце биологического материала не обнаружен фрагмент РНК, специфичный для вируса гепатита С или концентрация РНК возбудителя в образце ниже границы чувствительности теста.

Обращаем внимание, что сроки выполнения ПЦР-исследований могут быть увеличены при проведении подтверждающих тестов.

Точное определение РНК вируса гепатита С методом ПЦР

Бороться с ВГС крайне сложно – благодаря способности к мутации возбудитель недуга избегает иммунного ответа организма. Кроме того, диагностика гепатита С затруднена отсутствием симптомов – у носителей вируса часто нет видимых причин для обращения к гепатологу и прохождения ПЦР. ВГС имеет 6 генотипов и множество субтипов, их правильное определение является обязательным условием успешного лечения. Чтобы предотвратить трансформацию гепатита С в хроническую форму и получить шанс на восстановление работы печени, следует записаться на прием к врачу, обнаружив хотя бы один из признаков недуга. Наиболее распространены следующие симптомы: быстрая утомляемость, отсутствие аппетита, пожелтение кожи, боль в правом боку.

Что показывает ПЦР анализ

Для диагностики гепатита С часто используется анализ ПЦР – полимеразная цепная реакция. Данный метод позволяет увеличить концентрацию в пробе (биологическом материале) некоторых фрагментов ДНК. Благодаря эффективности и высокой точности анализ широко применяется в медицинской практике – с его помощью диагностируются наследственные и инфекционные заболевания. Суть анализа крови методом полимеразной цепной реакции заключается в многократном копировании определенного фрагмента ДНК. Выбранный участок должен удовлетворять заданным требованиям.

ПЦР диагностика при гепатите С

Полимеразная цепная реакция помогает гепатологу поставить окончательный диагноз. С помощью метода можно определить, есть ли в исследуемом материале HBV. Качественный метод позволяет подтвердить факт заражения и установить патогенез заболевания. Количественный анализ ПЦР дает информацию о том, насколько интенсивно развивается гепатит С. На основании полученных в результате диагностики данных врач назначает пациенту наиболее эффективный курс терапии.

Для нахождения в крови ВГС сегодня применяются специальные тест-системы. Метод ПЦР назначается, если:

  • результаты серологических исследований сомнительны;
  • нужно определить генотип вирусного гепатита С;
  • необходимо проконтролировать результативность противовирусного лечения.

Анализ осуществляется следующим образом: генетический материал (кровь) помещается в пробирку, к нему добавляются праймеры, ДНК-матрица, буферный раствор. Затем смесь нагревается до 95°С и охлаждается. После удаления из раствора остатков нуклеотидов специалист может определить, есть ли в исследуемом образце искомый ген. Если при диагностике методом ПЦР в крови пациента выявляется вирус гепатита С, врач определяет стадию заболевания и назначает курс лечения.

Анализ ПЦР РНК (качественный)

В результате качественного анализа может быть установлен только факт наличия вируса гепатита С в крови. Прохождение данного теста назначается всем, у кого выявлены антитела к ВГС. Результат исследования однозначен, возможны две формулировки: «обнаружено» и «не обнаружено». Первый вариант свидетельствует о том, что человек инфицирован, гепатит С прогрессирует и поражает новые клетки печени. Результат «не обнаружено» подтверждает отсутствие в крови ВГС. Наличие вируса в организме может быть выявлено качественным методом полимеразной цепной реакции только через одну-две недели после инфицирования.

Анализ ПЦР РНК (количественный)

Концентрацию вируса гепатита С (виремию) позволяет с высокой точностью установить количественный анализ ПЦР. Определив вирусную нагрузку (количество РНК), можно выбрать оптимальный способ лечения. Чем ниже уровень концентрации вируса, тем больше шансов на полное выздоровление. Количественный анализ используется не только во время начальной диагностики, но и в течение терапии. С его помощью можно контролировать успешность лечения и прогнозировать дальнейшее развитие болезни. Если прием медикаментов не приносит пользы, то количественное исследование укажет на отсутствие изменений. Такой результат должен стать основанием для внесения корректив в лечение.

Достоинства метода

Диагностический метод ПЦР имеет множество преимуществ, среди которых следует выделить чувствительность и точность. Анализ позволяет получить максимум информации о том, как ведет себя в организме больного РНК-вирус. Результаты исследования являются основой для подтверждения диагноза, если последний по какой-либо причине вызывает сомнения. Еще одно достоинство полимеразной цепной реакции заключается в возможности использовать для анализа различный биологический материал – не только кровь, но и мочу, слюну и другие выделения. Количественные и качественные исследования выполняются максимально быстро, что позволяет пациенту не томиться в ожидании результатов, а как можно раньше начать лечение.С помощью ПЦР можно определить, какова на данный момент активность вируса гепатита С и чем она угрожает больному. Если гепатолог назначил пациенту эффективную терапию, полимеразная цепная реакция покажет, что ВГС прекращает заражать новые клетки. Как правило, к такому результату приводит прием качественных медикаментов – например, индийских дженериков.

Количественное определение вируса Гепатита С методом ПЦР в режиме реального времени

Определение вируса гепатита С методом полимеразной цепной реакцией (ПЦР) отличается высокой чувствительностью и специфичностью (98%). Принцип ПЦР заключается в идентификации уникального фрагмента РНК, принадлежащего вирусу, после многократного удвоения исследуемого генетического материала в пробирке.

В сети КДЛ «ОЛИМП» ПЦР-исследования выполняются в режиме REAL-TIME – это означает, что после каждого аппаратного цикла (амлификации) происходит измерение количества РНК в биоматериале. Данная процедура сводит вероятность ложноположительного результата практически к нулю! Такая точность позволяет выставить диагноз гепатита С.

Количественный метод отображает вирусную нагрузку, то есть меру тяжести гепатита, путем указания количества вирусных частиц в крови пациента. Прежде всего, анализ необходим в нескольких случаях: при положительном качественном («положительно») выявлении вируса гепатита С, а также для мониторинга эффективности противовирусной терапии и определения тактики лечения.

Вирусная нагрузка измеряется в Международных Единицах на миллилитр крови. Меньше 1 млн – считается низкой, свыше – высокой. В КДЛ ОЛИМП имею​тся два анализатора с разной чувствительностью 300 МЕ/мл и 15 МЕ/мл (COBAS TaqMan).​ ​Е​сли количество вирусных частиц​ меньше указанных цифр – то результат расценивается как отрицательно .

Показания к назначению

Обнаружение РНК вируса гепатита С в плазме крови методом ПЦР;

Определение вирусной нагрузки ВГС;

Оценка эффективности лечения и определение тактики противовирусной терапии.

Результат выдается в виде количества вирусных частиц. Пример: «1,7*10 в 6ст. МЕ/мл », так как 1 МЕ = 4 вирусным копиям гепатита С. то 1,7 х 4 = 6,8. Результат означает, что вирусная нагрузка равна 6 800 000 копий вируса в 1 мл плазмы крови.

1 МЕ = 4 вирусным копиям гепатита С.

Результат меньше 300 МЕ/мл – считается отрицательным.

Источники: http://www.dnk-diagnostika.ru/analizy-i-tseny/analizy-po-razdelam/virus-gepatita-s-hcv.html, http://india-expres.ru/stati/tochnoe-opredelenie-rnk-virusa-gepatita-c-metodom-ptsr.(c), http://www.kdlolymp.kz/ru/node/3773




Комментариев пока нет!

Поделитесь своим мнением

Сумма цифр: код подтверждения

Интересное на сайте

Пиво от боли в голове

posted 17-6-2009 11:39 Знаю, что тема забавная. далее...

Можно ли при гепатите шоколад

Диета при хроническом гепатите Гепатит С и В далее...

Диета при урчании в кишечнике

Некоторые шумы в желудке и кишечнике, а далее...

Наиболее читаемое

Что пить при остром гастрите

Лечение острого гастрита Универсальных препаратов, способных мгновенно вылечить далее...

Какой гепатит с самый опасный

Какой гепатит самый опасный #8212; виды заболеваний печени, далее...

Болит живот подташнивает голова болит

Третий день тошнота, головная боль и боль далее...